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美洲錐蟲核酸質控(PCR)
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廣州健侖生物科技?有限公司
本司長期供應尼古丁(可替寧)檢測試劑盒,其主要品牌包括美國NovaBios、廣州健侖、廣州創侖等進口產品,國產產品,試劑盒的實驗方法是膠體金方法。
我司還有很多違禁品檢測、激素檢測、疫病類檢測、腫瘤標志物檢測等抗原抗體原料,還有熒光FITC標記類抗體、各種可標記單抗以及免疫磁珠等等產品以及各種生物原料和核酸質控品等,。
我司還提供其它進口或國產試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。
美洲錐蟲核酸質控(PCR)
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(PCR)
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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【】 楊永漢
【】
【騰訊 】
【公司地址】 廣州清華科技園創新基地番禺石樓鎮創啟路63號二期2幢101-3室
【企業文化宣傳】(PCR)
1. OsAGAP原位雜交正義、反義探針制備
對OsAGAP cDNA全長喺GenBank中做BLAST分析,撈取招異性zui強嘅片段(767bp-987bp)用于探針制備,據此設計5’四引子:5’-CTC TCA AAC TGC AAGCGT-3';三’四引子:5’-CAG CTC CTG CCT CAC CT-3'。將利用呢對引子擴增到嘅OsAGAP(767bp-987bp)片段,分別就以正向同反向鏈接到T easy載體上,用于探針制備。
利用DIG T7/SP6 Labeling kit(Roche)嚟做正義同反義探針嘅嘅高辛識認,反應程式依據其用戶手冊放。正義、反義探針分別就采用T7、SP6 RNA polymerase進行識認。攞線性化嘅質粒模板1ug,加DEPC處理嘅雙蒸水至13ul;理中加:
10 X NTP labeling mixture 2ul;
10 X Transcription buffer 2ul;
RNase inhibitor 1ul;
T7/SP6 RNA polymerase 2ul。
輕柔撈勻之后,37℃,溫育2hr;加2ulRNase-free嘅DNase15min,抹得甩DNA模板;37℃,溫育電泳肯定探針標好同模板抹得甩后,加2ul0.2M嘅EDTA(pH8.0)終止反應;加2.5ul4M LiCI,lul l0mg/ml tRNA同75ul無水乙醇,撈之后,-20℃沉淀過夜;4℃,13000rpm離心10min,去上清;沉淀用70%乙醇洗2次;超凈系臺吹干,溶于100ulDEPC處理嘅ddH2O中,55℃溫育l0min,分裝、存于-70℃士啤。
いち。OsAGAP元交雑正義、反義プローブ調製
OsAGAPにcDNA全長我GenBankでBLAST分析し、zui強の斷片をすくう異性(767bp-987bp)用プローブ調製、この設計ご』の四プライマー:ご」- CTC TCA AAC TGC AAGCGT-3 ';3』の四一聲:ご」- CAG CTC CTG連続冷卻変態CAC CT-3 '。を利用してねまくら増幅OsAGAP(767bp-987bp)までの斷片を、それぞれ同じでは逆にリンクeasy擔體にT用プローブ調製。
利用DIG T7 / SP6 Labeling kit(Roche)して大量に正義と反義プローブの意識の高い辛見分けて、反応によってそのプログラムマニュアル。正義、反義プローブがそれぞれ採用T7、SP6 RNA polymeraseを識る。破る線形化の1ugプラスミドテンプレートに加え、DEPC処理の雙蒸水から13ul ;理に加:
じゅうX NTP labeling mixture 2ul、
じゅうX Transcription buffer 2ul、
RNase inhibitor 1ul、
T7 / SP6 RNA polymerase 2ul。
なめらかに均等にすくい後、37℃で、インキュベーション2hr;2 ulRNase-freeのDNase15min拭いて、振られDNAテンプレート; 37℃で、インキュベーション電気泳動肯定プローブ標いいつけて同テンプレートに振られた後、2 ul0.2MのEDTA(pH8.0)停止反応;加2.5ul4M LiCI、lul l0mg / ml tRNA同75ul無水エタノール、すくい取って- 20℃の瀋殿泊まります;4℃で、13000rpm遠心10min、清;瀋殿で70%エタノール2回入る;超純係臺溶け、乾い100ulDEPC処理のddH2Oで、55℃インキュベーションl0min、充填、在庫は- 70℃士ビール。