- 产品描述
甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒
广州健仑生物科技有限公司
产品规格:50T/盒;
保存条件:避光 -20度 保存。
我司还提供各种流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒、轮状病毒、杆菌、链球菌、热带病毒等等核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法),还有各种原料和质控品,随时欢迎您的来电: 杨
甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒
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铁蛋白嘅提取
1)配制2%镪水铵液,并以1mol/L嘅NaOH或者HCl调pH值,啱啱为5.85。攞1g铁蛋白溶于100ml嘅2%硫酸铵液中。
2)加20%硫酸镉,令zui终浓度为5%,捞匀,4℃过夜。
3)1500g离心(4℃)2h,去上清。仍加2 %镪水铵至100ml,捞匀,离心,抹得甩不纯沉渣。
4)于上清液中重新加20%硫酸镉,重复步骤⑵,离心,去上清。
5)检查沉渣,置显微镜下检查,应具有典型嘅黄褐色结晶,结晶为六角形,双一四点结构,如结晶唔典型,应继续重复以上步骤。
6)以少量嘅蒸馏水溶解,再加50%饱和镪水铵溶液,令之沉淀,离心,去上清。
7)重复步骤⑹一次。
8)以少量蒸馏水溶解,常水透析24h后,以0.05mol/L pH7.5 PBS透析24h。
9)100000r/min离心2h,抹得甩上部冇色上清液(约3/4总量),置4℃过夜。
10)用微孔滤膜(孔径0.45μm)隔,令铁蛋白含量为65mg/ml-75mg/ml,分装,4℃保存唔冻做保存,以免铁蛋白结构遭破坏。
2.铁蛋白-抗体交联法
1)以0.3Mol/L pH 9.5硼酸盐缓冲液将铁蛋白稀释成20mg/ml-25mg/ml。
2)以一∶1000(W/W)嘅比例加XC液室温搅拌45min,离心去沉淀。
3)以0.3Mol/L pH 9.5硼酸盐缓冲液将提纯lgG衬成5mg/ml,以一∶4嘅比例(V/V)加IgG与铁蛋白-XC液,4℃搅拌48h。
4)以0.1Mol/L式碳铵溶液透析过夜,以除去多余嘅异氰酸盐,再以0.05Mol/l pH 7.5 PBS透析,令pH值恢复到生理水平。
5)超速离心以1.00×105g离心5h,去上清,沉淀以0.05Mol/L PBS悬浮,再次离心,以除去未结合嘅IgG。
6)以血清学同免疫学方法测定结合抗体嘅特异性、免疫活性与及识认效应,如果用步骤严格,结果系满意嘅。
3.铁蛋白-抗体结合物处理标本
1)将标本以5%福尔马林pH 7.2(4℃)PBS液入墙40min-60min。
2)用冻嘅PBS液洗涤,离心。
3)如系组织蚊,就喺解剖显微镜下切更忽,放入试管中,加埋铁蛋白-抗体结合物置室温20min,不时振荡,
4)以冻PBS液洗涤三次,离心。
5)沉淀以2.5%戊二醛入墙20min,以PBS洗涤。
6)再以锇酸入墙,脱水包壅。
都可以先超薄切片,再进行铁蛋白-抗体结合物染色。
唔识用如下:
1)将培养细胞以1%福尔马林PBS液入墙(4℃)。
2)PBS液洗涤离心。
3)以0.5ml,30%牛血清蛋白PBS液悬浮置入胶透析膜袋中,再将袋置于嗍水剂粉末上,对牛血清白蛋白成胶状物时,将透析袋移至2%戊二醛PBS液(pH7.5)中入墙3h。
4)拎出,切忽,以PBS液洗涤。
5)置干燥器中以矽胶糠。
6)包壅、切片、喺水上有冇收集切片置于经4%牛血清白蛋白PBS液处理嘅搂有胶膜嘅在网上(牛血清白蛋白嘅处理在于少铁蛋白结合物非特异性吸附于在网上)。
7)滴一滴铁蛋白-抗体结合物于在网上。
8)5min后,浮丝网于PBS液面,标本口当面同下,以除去多余嘅结合物。
9)冻做后,滴一滴醋酸双氧铀或者氢氧化铅以复染。
10)水洗、晾干、电镜观察。